小智讲堂 | 【试纸条的开发到底有多难】之“方法检出限”
在分析化学领域，方法检出限（Method Detection Limit，简称MDL）被定义为在既定条件下，某分析技术能够一致检测到的最低物质浓度或最小量。它是衡量分析方法灵敏度和可靠性的关键指标。对于胶体金检测试纸条而言，其方法检出限特指经过规定前处理后的样本中，能使试纸条显示阳性反应的目标物浓度。此前已讨论过试纸条的灵敏度，现在我们将重点探讨其灵敏度与方法检出限之间的区别。
在检测值层面，灵敏度体现在试纸条刚开始表现出抑制效果时，T/C值介于0.7至1.0之间的目标物浓度。而方法检出限则是指试纸条呈阳性，T/C值在0.3至0.7间的目标物浓度。确定灵敏度时，通常采用溶剂空白制备不同浓度的目标物工作液，以找到能引起试纸条抑制的最低浓度。
相对地，方法检出限是通过向空白样本中添加目标物标准溶液进行测试，目的是找到使试纸条呈现阳性所需的前处理步骤（主要涉及确定样本的最佳稀释比例，例如：1克样本加6毫升提取液即是6倍稀释，若有进一步稀释则需计算累计倍数）。
开展试纸条开发之前，我们会初步评估其可用性，计算公式为：方法检出限=试纸条灵敏度×稀释倍数。根据经验，为保证有效前处理，稀释倍数应至少高于3倍。例如，若国家标准限量为10 mg/kg，试纸条的灵敏度应优于约3.33 mg/kg。
就农残半定量检测试纸条产品而言，其方法检出限应与国家标准设定的农药最大残留限量相匹配。如此，试纸条阳性即表示农残超标，阴性则意味着农药含量低于国标限值。使用说明中通常会包含一个稀释表，因不同基质的限量要求各异，故需采用不同的稀释比率进行测试。
要达到理想中的方法检出限，需要克服一系列挑战。
挑战一
国标中的最大残留限量值是基于中国人的饮食习惯、农药毒性研究和农药登记信息等因素制定的，因此各基质的限量值各不相同。面对众多蔬菜品类和不同的限量要求，测试前处理方法是一项繁复且需多次调整的工作。
挑战二
胶体金试纸条生产过程中的变量众多，即使是相同原料和生产者，不同批次的试纸条灵敏度也可能有差异。因此，要实现半定量精度，必须对每批试纸条进行校准。
挑战三
随时间推移，胶体金试纸条可能老化，导致灵敏度下降；当降至某一水平时需重新校准，如何及时更新客户的检测参数也成为一项挑战。
综上，不具备强烈责任感和扎实研发基础的企业是难以坚持战胜重重挑战的，也就难以保证生产出合格的半定量产品。
壹拾智检通过条形码标记的标准化胶体金试纸条，赋予产品身份识别信息和标准曲线信息。在实际检测过程中，系统通过识别试纸条条形码信息，自动调用相应的标准曲线进行半定量计算，不同批次间产品的标准曲线可在云端自动更新，实现批批标定，保证检测限与国标限量值的精准匹配。
同时，研发和质控人员在后台做了大量工作，对每批试纸条在不同农产品基质（品种）上的表现进行验证，对出厂时间久、可能开始老化的试纸条进行跟踪验证并在云端更新标曲，以尽力保证客户拿到手的产品准确度高、稳定性强。
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北京壹拾智检生物科技有限公司
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